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細(xì)胞凍存失敗的原因,你知道嗎?

點擊次數(shù):245  更新時間:2024-06-18

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細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵步驟。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。
隨著細(xì)胞被冷凍至冰點以下,懸液中冰晶和溶質(zhì)的濃度有所增加。如果冷卻過程中,胞內(nèi)水分可以滲出細(xì)胞,則可以減少胞內(nèi)冰晶。通常1℃/min的降溫速度可以促進(jìn)此過程。但是,水分的喪失會導(dǎo)致細(xì)胞收縮,當(dāng)這種收縮達(dá)到一定程度,又會導(dǎo)致細(xì)胞活性的劇烈下降。冷凍保護(hù)劑,如甘油或者二甲基亞砜(DMSO),可以緩解這種效應(yīng)。細(xì)胞凍存的標(biāo)準(zhǔn)程序是在含有冷凍保護(hù)劑的培養(yǎng)基中,將細(xì)胞緩慢冷凍至–70℃,然后將凍存管轉(zhuǎn)移到液氮中以保持低于–130℃的環(huán)境。

5%-10%的甘油和DMSO是凍存保護(hù)劑。雖然DMSO對細(xì)胞有毒性,但是與甘油相比,其滲入細(xì)胞的速度更快,而且凍存重復(fù)性更好(而且細(xì)胞復(fù)蘇效率更好)。右旋糖酐系蔗糖是經(jīng)腸膜狀明串珠菌-1226(Leuconostoc mesenteroides)發(fā)酵合成的一種高分子葡萄糖聚合物,右旋糖酐-40(Dextran-40)別稱低分子右旋糖酐,右旋糖酐40的重均分子量(Mw)應(yīng)為32000~42000。右旋糖酐-40可以維持滲透壓和 PiH , 提供適宜細(xì)胞存活的介質(zhì)環(huán)境。
OriGen生物醫(yī)學(xué)公司成立于1997年,是一家總部總部位于德克薩斯州*。OriGen 為細(xì)胞培養(yǎng)和冷凍保存提供關(guān)鍵性的器材。制造的產(chǎn)品非常適用于組織存儲,細(xì)胞培養(yǎng)/存儲,干細(xì)胞擴(kuò)增和長期冷凍保存,并且特別適合于液氮冷凍保存。



產(chǎn)品推薦

品牌

貨號

產(chǎn)品描述

OriGen

CP-10

USP級 DMSO二甲基亞砜

OriGen

CP-70

USP級 DMSO二甲基亞砜

OriGen

CD-50

DMSO/Dextran/remainder water

55%二甲基亞砜,5%右旋糖酐40混合液



產(chǎn)品特點

  • GMP車間全封閉生產(chǎn)

  • 無菌過濾

  • 無熱源

  • 無內(nèi)毒素

  • 無支原體污染(確保無支原體污染,品質(zhì)遠(yuǎn)超眾多公司的產(chǎn)品)

  • ORIGEN USP級 DMSO通過CE、USP、EP認(rèn)證,且有CDE受理號


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